Apostila bioquímica celular

Apostila bioquímica celular

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A POSTILA DE BIOQUÍMICA - roteiros para aulas práticas CURSO DE FARMÁCIA

APOSTILA DE BIOQUÍMICA

ROTEIROS PARA AULAS PRÁTICAS

APRESENTAÇÃO

Esta apostila inclui os roteiros para as aulas práticas de Bioquímica Celular e Bioquímica Animal, além do aspecto teórico das aulas ministradas em laboratório.

A apostila também traz exercícios para estudo dirigido e questões para serem entregues em relatório. É necessário observar, entretanto, que apenas as aulas de Bioquímica Celular exigem relatório, enquanto que as aulas de Bioquímica Animal solicitam apenas a resolução de questões de estudo dirigido.

BIOQUÍMICA CELULAR

BIOQUÍMICA CELULAR

AULA 1

pH e soluções tampão

OBJETIVOS

Objetivo geral:

- reconhecer a importância do controle de pH na homeostase dos organismos, enfatizando os conceitos de pH e soluções tampão

Objetivos específicos:

- determinar o pH de soluções através de método colorimétrico, utilizando indicador universal

- entender o funcionamento de soluções tampão e sua importância fisiológica

EXPERIMENTO

A. REAGENTES

- Soluções de pH determinado 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10

- Indicador universal

0,05g de laranja de metila; 0,15g de vermelho de metila; 0,3g de azul de bromotimol; 0,35g de fenolftaleína e álcool etílico a 66% para 1L

- Hidróxido de sódio NaOH 0,1 mol/L

- Ácido clorídrico HCl 0,1 mol/L

- Solução-tampão pH 7,0

B. TÉCNICA

1. ESCALA PADRÃO

Preparar uma bateria de 8 tubos de ensaio

Colocar em cada tubo 1 mL de solução pH 3 a 10

Adicionar 5 gotas do indicador universal a cada tubo

Adicionar 9 mL de água destilada a cada tubo e homogeneizar

RESPONDA: Qual a função da escala padrão?

2. EXPERIMENTO I

Preparar uma bateria de 4 tubos de ensaio, de acordo com a tabela abaixo:

Tubos

Reagentes

1

2

3

4

Indicador universal

5 gotas

5 gotas

5 gotas

5 gotas

Água destilada

10 mL

9 mL

10 mL

9 mL

Solução Tampão pH 7,0

-

1 mL

-

1 mL

pH

O pH deve ser avaliado de acordo com a escala padrão preparada no item 1 e anotado na tabela anterior.

3. EXPERIMENTO II

Após o experimento I, adicionar os seguintes reagentes aos 4 tubos anteriores, de acordo com a tabela abaixo:

Tubos

Reagentes

1

2

3

4

NaOH 0,1 mol/L

1 gota

1 gota

-

-

HCl 0,1 mol/L

-

-

2 gotas

2 gotas

pH

Soprar o ar expirado

15 segundos

1 minuto

-

-

pH

-

-

HCl 0,1 mol/L

-

-

-

Gota a gota

nº de gotas=_____

Anote na tabela o pH resultante após a adição de NaOH e HCl aos tubos e depois sopre o ar expirado nos tubos 1 e 2 durante o tempo previsto na tabela e anote o resultado.

Por fim adicione HCl 0,1 mol/L gota a gota no tubo 4 até que este resulte na cor do tubo 3 e anote o número de gotas.

ASPECTOS TEÓRICOS

ÁGUA: AMBIENTE CELULAR

- Substância mais abundante nos seres vivos

- Perfaz 70% ou mais da massa da maioria dos organismos

- Evolução marcada pelas propriedades do meio aquoso, onde a vida começou

- Forças de atração entre moléculas de água

- Pequena tendência da água se ionizar

- A molécula de água e seus produtos de ionização influenciam profundamente a estrutura, a automontagem e as propriedades de todos os componentes celulares

- A água pura é ligeiramente ionizada

H2O ↔ H+ + OH-

IONIZAÇÃO DA ÁGUA

H2O ↔ H+ + OH-

A ionização da água é expressa por uma constante de equilíbrio (Ka)

O Ka = [H+] [OH-]/ [H2O] = 1,8 x 10-16 mol/L a 25ºC

Água é ácido fraco, só uma fração muito pequena se dissocia e se considera sua concentração constante e = a 55,55mol/L

(1000g/18 = 55,55mol/L)

Produto iônico da água = [H+] [OH-] = Kw = 1,8 x 10-16 . 55,55

[H+] [OH-] = Kw = 1,0 x 10-14

O Kw expressa o produto da [ ] de H+ e íons OH- em soluções aquosas

Em água pura a 25ºC, [H+] = [OH-] = 1 x 10-7 mol/L

Assim se 0,1 mol/L de HCl for adicionado à água pura, a nova [] de H+ será 0,1 mol/L (HCl é ácido forte, se dissocia completamente) e a de OH- 1 x 10-13, mantendo o valor de Kw = 1 x 10-14.

pH: ESCALA E SIGNIFICADO

Os valores de prótons e íons hidróxidos em soluções diluídas são muito pequenos

Por isso foi definido o termo pH como escala logarítmica de base 10:

pH = log 1/[H+] = - log [H+]

O termo pH expressa a concentração de prótons

O pH da água pura é, então, pH = - log (10-7) = 7

É importante notar que a diferença de uma unidade na escala de pH significa uma diferença de 10 vezes na concentração de prótons

Assim, uma solução pH 4 possui [H+] = 10-4 mol/L e outra pH 5 possui [H+] = 10-5 mol/L

SOLUÇÃO TAMPÃO

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